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更新時間：2019-04-29 
瀏覽次數：6168紅細胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×) 操作步驟：
注意：絕大多數情況下，應使用無菌去離子水稀釋RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用，流式細胞術除外。
A、組織細胞樣本的常規操作
1、制備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當方法制備成細胞懸液，離心棄上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。 3、離心，棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。
4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2和步驟3各一次。
5、洗滌：根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃離心，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。
B、組織細胞樣本的快速操作(無需洗滌)
1、制備細胞懸液：新鮮組織經胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，制備細胞懸液，離心棄上清。
2、裂解：加入細胞5倍細胞沉淀體積的1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻裂解。
3、加入PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，輕柔混勻。
4、離心5min，棄紅色上清，本離心步驟亦可在室溫下操作。
5、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2～4各一次。
6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數、培養等后續實驗。
C、血液樣本的常規操作
1、取新鮮抗凝血，離心，棄上清。
2、 裂解：加入1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～5min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。
3、離心：棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。
4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2和步驟3一次。
5、洗滌： 根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，輕柔混勻重懸沉淀；4℃離心，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。
6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數、培養等后續實驗。
D、血液樣本的快速操作(無需洗滌)
1、新鮮抗凝血中加入10倍體積的1×RBC Lysis Buffer，輕輕吹打混勻，裂解4～15min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。
2、加入 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，輕柔混勻。
3、離心，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。
4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2和步驟3一次。
5、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數、培養等后續實驗。
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