上海信帆生物科技有限公司 全國咨詢熱線：13814106335
PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類
更新時間：2020-04-29 
瀏覽次數：1843瓊脂糖凝膠CL-4B現貨供應-上海信帆生物
瓊脂糖凝膠CL-4B
規格：10ml/50ml/100ml/500ml
產品說明
瓊脂糖凝膠 CL-4B 是在瓊脂糖凝膠 4B 的基礎上通過交聯使微球的剛性增強，理化性能提高，有利用于工業
生物試劑。該介質用于生物大分子的凝膠層析。本品呈白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質。本產品具有很
高的化學穩定性、高流速、較好的機械性能、可多次重復使用等特點，非特異性吸附低，回收率高，可用有機溶
劑及 1~2mol/L 的 NaOH 在位清洗，適用于工業規模生物試劑，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多
肽的凝膠色譜純化。
操作步驟：(僅供參考)
1、裝柱
凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿
凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于 60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。
以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩定后將柱床壓緊，接好管路。
（1）讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
（2）選擇一根一定直徑的柱子，長約 30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠（約為柱床體積的 1.15 倍），清洗掉
20%乙醇，抽干，用緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1 的比例）配成勻漿。
（3）將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務必使底端無氣泡。
（4）用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內，注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內自由沉
降，連結好柱子頂端柱頭。
（5）打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的 1.33 倍的流速流過，使柱床穩定。用緩沖液平衡柱子，到柱床穩定。
（6）好用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。
項目
說明
基質
4%交聯瓊脂糖
排阻極限
6×104~2×107 (球蛋白)
形狀
球形
粒徑
45~165 μm
高流速
30 cm/h*
耐熱
pH7 水中 120℃20min
耐壓
0.025 MPa
pH 穩定性
3~13(長時間)，2~14(短時間，在位清洗)
化學穩定性
可耐 8mol/L 尿素、6mol/L 鹽酸胍；可耐有機溶劑，如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、
丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈
檢測條件
層析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm，25℃，流動相為 0.1mol/LNaCl2、平衡:讓緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導和 pH 不變。
3、上樣:
（1）樣品用緩沖液配制，要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。
（2）介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的，分子量大的先流出來。
（3）上樣體積約為柱體積的 1~2%，越小分離越好。
4、洗脫:用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5、再生:一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。
6、在位清洗
（1）對于以離子鍵結合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。
（2）對沉淀蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類，可用 1M NaOH 去除。
（3）對強疏水性結合的蛋白、脂類等，用 4~10 倍柱體積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗，但要注意有機溶劑
的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產生氣泡。
清洗完畢后，用至少 3 倍緩沖液平衡柱子。
7、去熱源
用 0.5M 的氫氧化鈉清洗柱子 5~6 小時或用 0.1M 的氫氧化鈉 24 小時。或用以下方法步驟去除：
（1）2 倍柱體積的 70%乙醇；
（2）2 倍柱體積 50mM Tris-HCl pH7.5；
（3）1 倍柱體積 4M 尿素；
（4）3 倍柱體積的 Tris 緩沖液+0.1M NaCl；
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
8、 消毒:用 0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。
注意事項
在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進入
產品應密封貯存在 4℃~25℃（保存溶液為 20% 乙醇），通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。
用過的柱子貯存在 4℃（20% 乙醇）。
本產品避免與氧化劑接觸；避免長時間暴露在空氣中。
保質期：5 年。
瓊脂糖凝膠CL-4B現貨供應-上海信帆生物
您的位置：
