上海信帆生物科技有限公司 全國咨詢熱線：13814106335
PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類
更新時間：2022-01-14 
瀏覽次數：5203油紅O染色液實驗流程及注意事項！
脂質(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機溶劑(如乙醇、乙MI等)。人體的脂肪主要有兩種：1、儲存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、腎、胰腺等部位；2、結構脂肪，如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等)，主要分布于細胞內。中性脂肪(Neutralfat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類，呈中性。中性脂肪染色經常采用蘇丹II、蘇丹III、蘇丹IV、蘇丹黑B、油紅O法等，傳統方法采用蘇丹染料，最近發現偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色，油紅O是很強的脂溶劑和染脂劑，較易與甘油三脂結合呈小脂滴狀，與磷脂結合力稍差，其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。
油紅O染色液(培養細胞專用)主要用于顯示人工培養細胞的脂肪變性和類脂質的異常沉著，細胞內出現多數中性脂肪滴，鑒別培養細胞中所發生的變化及其性質，標本不采用含有乙醇的固定液，脂肪的陽性染色結果呈橘黃至紅色，但具體顏色因脂質濃度而定。
產品名稱：油紅O染色液（細胞專用）
產品規格：4×20ml
儲存條件：4℃
有效期：12個月
用途：專門用于脂肪/脂滴染色
產品組成
名稱 | 4×20ml | 4×50ml | Storage | |
試劑(A): ORO Fixative | 20 ml | 50 ml | RT 避光 | |
試劑(B): ORO Stain | B1: ORO Stain A | 12 ml | 30 ml | 4℃ 避光 |
B2: ORO Stain B | 8 ml | 20 ml | RT | |
按B1:B2=3:2比例混合靜置10min, 即為ORO Stain，不宜提前配制；配好后，若有沉淀， 過濾之后再使用。 | ||||
試劑(C): Mayer蘇木素染色液 | 20ml | 50 ml | 4℃ 避光 | |
試劑(D): ORO Buffer | 20ml | 50 ml | RT | |
自備材料：
60%異丙醇、蒸餾水
實驗步驟（僅供參考）：
一、培養細胞
1、 移除細胞培養基，用PBS洗兩次，加ORO Fixative固定液固定20-30min。
2、 棄去固定液，用蒸餾水洗2次。
3、 加入60%異丙醇浸洗5min。
4、 棄去60%異丙醇后加入新配制好的ORO Stain，浸染10-20min。
5、 棄去染色液，水洗2-5次，直到無多余染液。
6、 加入Mayer蘇木素染色液，復染核1-2min。棄去染液后水洗2-5次。
7、 入ORO Buffer 1min，棄去。
8、 加入蒸餾水覆蓋細胞并在顯微鏡下觀察。
二、細胞涂片
1、 制備新鮮骨髓、血液涂片，入ORO Fixative固定10～15min。
2、 取出涂片，放于流通的空氣中10～15min。
3、 入新配制好的ORO Stain，浸染15min。
4、 入60%異丙醇漂洗20～30s，流水沖洗，入蒸餾水稍微清洗。
5、 入Mayer蘇木素染色液，復染核2min。
6、 入ORO Buffer 1min。
染色結果：
中性脂肪 | 橙紅色或橘紅色 |
磷脂 | 粉紅色 |
細胞核 | 藍色 |
注意事項:
1、 ORO染色液不夠穩定，易產生沉淀，不宜提前配制。
2、 Mayer 蘇木素染色液復染時間不能過長。
3、 染色結果不能長期保存，應盡快觀察及照相。
4、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產品僅供科研實驗用，不做其它用途！
您的位置：
