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更新時(shí)間：2013-05-06 
瀏覽次數(shù)：4381酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （又稱酵素免疫分析法 ，Enzyme-linked immunosorbent assay，簡稱ELISA ）利用抗原 抗體之間專一性鍵結(jié)之特性，對檢體進(jìn)行檢測；由於結(jié)合於固體承載物（一般為塑膠孔盤）上之抗原或抗體仍可具有免疫活性 ，因此設(shè)計(jì)其鍵結(jié)機(jī)制後，配合酵素呈色反應(yīng)，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，並可利用呈色之深淺進(jìn)行定量分析。 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （又稱酵素免疫分析法 ，Enzyme-linked immunosorbent assay，簡稱ELISA ）利用抗原 抗體之間專一性鍵結(jié)之特性，對檢體進(jìn)行檢測；由于結(jié)合于固體承載物（一般為塑膠孔盤）上之抗原或抗體仍可具有免疫活性 ，因此設(shè)計(jì)其鍵結(jié)機(jī)制后，配合酵素呈色反應(yīng)，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，并可利用呈色之深淺進(jìn)行定量分析。 根據(jù)待測樣品與鍵結(jié)機(jī)制的不同，ELISA可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方式，主要以三明治法（ sandwich ）、間接法（ indirect ）、以及競爭法（ Competitive ）三種為主，以下為各種方法之介紹。根據(jù)待測樣品與鍵結(jié)機(jī)制的不同，ELISA可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方式，主要以三明治法（ sandwich ）、間接法（ indirect ）、以及競爭法（ Competitive ）三種為主，以下為各種方法之介紹。
三明治法常用於檢測大分子抗原，一般之操作步驟為:三明治法常用于檢測大分子抗原，一般之操作步驟為:
三明治法分別以兩種抗體對檢體中的抗原進(jìn)行兩次專一性辨認(rèn)，因此專一性相當(dāng)高，但此待測抗原必須是多價(jià)抗原，如此才可獲得兩種以上的專一性抗體，以分別進(jìn)行夾心；而且此法需要足夠的表位空間以進(jìn)行抗原抗體的夾心，所以並不適用於半抗原或小分子抗原等分子量較小之標(biāo)的。三明治法分別以兩種抗體對檢體中的抗原進(jìn)行兩次專一性辨認(rèn)，因此專一性相當(dāng)高，但此待測抗原必須是多價(jià)抗原，如此才可獲得兩種以上的專一性抗體，以分別進(jìn)行夾心；而且此法需要足夠的表位空間以進(jìn)行抗原抗體的夾心，所以并不適用于半抗原或小分子抗原等分子量較小之標(biāo)的。
間接法常用於檢測抗體，一般之操作步驟為：間接法常用于檢測抗體，一般之操作步驟為：
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制，一般用於檢測小分子抗原，其操作步驟為：競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：
當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著於孔盤上時(shí)，一般會考慮使用競爭法ELISA。當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時(shí)，一般會考慮使用競爭法ELISA。
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