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更新時間：2015-08-10 
瀏覽次數：2054上海信帆生物代理銷售“丙酮酸脫氫酶（PDH）試劑盒"，現貨供應，提供技術指導和售后服務，歡迎。
測定步驟
用蒸餾水于605nm處調零。
（1）取900μL工作液加入1mL玻璃比色皿，在37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）中孵育5min。
（2）取出比色皿，加入50μL酶液，混勻；立即記錄605nm處初始吸光值A1，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）中準確反應1min，記錄605nm處1min后的吸光值A2，計算ΔA=A1-A2。
丙酮酸脫氫酶（PDH）試劑盒注意事項
1、測定過程中所有試劑和樣本在冰上放置，以免變性和失活。
2、比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。
3、兩個人同時做此實驗，一個人比色，一個人計時，以保證實驗結果的準確性。
PDH活性計算
1、組織中PDH活性計算:
（1） 按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白在反應體系中每分鐘消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定義為一個酶活性單位。
PDH活性（U/mg prot）=反應總體積（950μL）÷樣本體積（50μL）÷反應時間(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系數（21×10-3）×ΔA ÷蛋白濃度(mg/mL)=905×ΔA÷蛋白濃度(mg/mL)
（2） 按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織在反應體系中每分鐘消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定義為一個酶活性單位。
PDH（U/g 鮮重）=反應總體積（950μL）÷樣本體積（50μL）÷反應時間(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系數（21×10-3）×ΔA ÷樣本鮮重(g/mL)=905×ΔA ÷樣本鮮重(g/mL)
2、細菌或培養細胞中PDH活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白在反應體系中每分鐘消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定義為一個酶活性單位。
PDH活性（U/mg prot）=反應總體積（950μL）÷樣本體積（50μL）÷反應時間(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系數（21×10-3）×ΔA ÷蛋白濃度(mg/mL)=905×ΔA÷蛋白濃度(mg/mL)
（2） 按細菌或細胞密度計算
單位的定義：每1萬個細菌或細胞在反應體系中每分鐘消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定義為一個酶活性單位。
PDH活性（U/104 cell）=反應總體積（950μL）÷樣本體積（50μL）÷反應時間(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系數（21×10-3）×ΔA ÷細菌或細胞密度(104 cell /mL)=905×ΔA÷細菌或細胞密度(104 cell /mL)
丙酮酸脫氫酶（PDH）試劑盒
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