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產品名稱：鐵離子比色法檢測試劑盒產品貨號：XFP10451產品規格：100T儲存條件：4℃保存本產品僅供科研實驗用，不做其它用途！
產品型號：廠商性質：生產廠家更新時間：2024-10-25訪 問 量：2094
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產品名稱：鐵離子比色法檢測試劑盒
產品貨號：XFP10451
產品規格：100T
儲存條件：4℃保存
細胞鐵離子檢測試劑盒可用于培養細胞中鐵離子定量檢測。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子，線性范圍5~300uM。產品包括標準品和空白對照，本試劑盒可進行100個樣品的檢測。鐵是人體必需的元素之一，對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用，血液中鐵的含量不足，就會造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細胞內，各組織、器官包括各內分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內含量較為豐富。成人體內含鐵3～5克，大部分都以蛋白質復合物形式存在，極少部分以離子的形態存在。
檢測原理：
鐵與蛋白結合成復合物，在酸性介質中鐵從復合物中解離出來，再被還原劑還原成二價鐵， 并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在 540-580nm 處可比色測定。
產品組成：
A. 細胞裂解液： 20 ml
B. 緩沖液： 5ml
C. 檢測劑： 3ml
D. 標準品： 1ml
E. 稀釋用液： 20ml
實驗步驟：
1. 樣品準備（以24孔板為例）：
將含鐵元素DMEM培養過的細胞用冷的PBS 2ml洗兩遍，將PBS吸棄（若不馬上檢測可將其凍存于-20℃）。200ul/孔裂解液裂解細胞，置于搖床裂解2h。
2. 標準品的稀釋：用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標準品母液稀釋為：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設置0濃度對照反應管。
3. 將緩沖液與4.5%高錳-酸鉀溶液按1:1混勻，稱為混液A。 注意：用戶自備4.5%高錳-酸鉀溶液 5ml。
4. 參考下表使用1.5ml離心管，設置空白對照管、標準品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高，用裂解液適當稀釋后再進行測定。
空白對照 稀釋后的標準品 裂解的樣品
稀釋用液 100μl －
混液A 100μl 100μl 100μl
樣品 － － 100μl
標準品工作液 － 100μl －
5. 混勻，60℃ 孵育1h。
6. 冷卻至室溫，將管蓋與管壁上的液滴離心入管底。
7. 加入30ul 鐵離子檢測劑，混勻，室溫孵育，30min。
8. 取200ul 于96孔板，在550nm測定吸光度。如果不能測定550nm，也可以在540nm~580nm范圍內檢測。
9. 繪制標準曲線并計算鐵離子濃度。
本產品僅供科研實驗用，不做其它用途！
鐵離子比色法檢測試劑盒
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